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CAR-T细胞疗法

时间:2022-01-12 浏览次数:86

2021年6月22日,复星凯特CAR-T细胞治疗产品益基利仑赛注射液(又称阿基仑赛,代号:FKC876)已正式获得批准。


2021年9月1日,药明巨诺靶向CD19的CAR-T产品瑞基奥仑赛注射液(Relma-cel,商品名:倍诺达)已正式获批。至此,我国已有2款CAR-T产品获批上市。


关于CAR-T疗法的“神奇"效果,也贴上了各种标签:“天价,120万一针"、“只需要注射一次、癌细胞清零"、“2个月癌细胞清零"、“抗癌神药"、“可以治愈癌症"……


一、什么是CAR-T疗法呢?

在体内,T细胞是发挥免疫效应的主力,但T细胞受体 (TCR)一般在主要组织相容性复合体(MHC)出现的情况下才能被激活,而肿瘤细胞有降低 MHC class I 分子表达的能力,从而避免被免疫系统识别。

肿瘤细胞逃过TCR的识别,发生免疫逃逸,T细胞便不能发挥作用。机体便无法通过免疫反应去杀伤肿瘤。为了克服TCR的这一限制,嵌合抗原受体(CAR)应运而生。

CAR-T细胞是经过基因工程改造、以表达靶向特定抗原的嵌合受体T细胞(Chimeric Antigen Receptor T-Cell),它能帮助T细胞识别、并消灭相应抗原的细胞。

正常的T细胞的TCR识别的多为靶细胞内部的肽段,而且识别必须是依赖靶细胞的MHC分子的展示。

CAR-T细胞通过CAR识别靶细胞的表面抗原,包括细胞表面的受体、配体等蛋白,增加了靶点识别的广度,且这种识别不具有MHC限制。

因此,可以减轻T细胞受体(TCR)诱导免疫的局限性。治疗时,患者血液中的T细胞被提取出,经过改造后可表达出嵌合抗原受体,从而识别并攻击表达特定抗原的肿瘤细胞及其他细胞。

简单来说CAR-T技术就如同给你的T细胞装上了“GPS导航系统",能自动识别癌细胞,并进行杀伤,成为免疫军团中的“超级特战队"。



二、CAR-T细胞疗法可分为以下步骤:

治疗前评估:通过一系列的评估判断患者是否适合CAR-T细胞治疗(在其它治疗手段失效后);

T细胞的分离与富集:通过白细胞分离术收集患者的外周血单核细胞(PBMC细胞),再分离出特定的T细胞亚群;

T细胞改造:T细胞在实验室内进行基因工程改造,这是CAR-T细胞生产的核心技术,利用到载体将CAR基因导入T细胞,使细胞表面表达嵌合抗原受体;

扩增:体外培养,大量扩增CAR-T细胞至所需数量,一般为十亿至百亿级别,需要几周左右;

回输:把扩增好的CAR-T细胞输回病人体内;

恢复:严密监护病人,控制前几天身体的剧烈反应。患者通过CAR-T细胞的治疗,病情得到缓解或治愈。


CAR-T治疗流程图


三、MACS 技术磁分选金标准  

MACS微珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒,用于目的细胞分离或者去除细胞的磁性标记。


微珠直径约有50nm,比细胞小200多倍,体积为细胞的百万分之一,光学显微镜下不可见。微珠由多聚糖和氧化铁组成,无细胞毒性,对细胞无损伤,可以生物降解


MACS微珠主要有三种:直标微珠、间标微珠、多选微珠。

图片



四、MACS 细胞磁性分选基本流程

磁珠标记

磁性分选

磁珠标记细胞洗脱



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