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病理 | 组织包埋技术(下)

时间:2022-10-16 浏览次数:567

在上篇文章中介绍了什么是组织包埋以及各种包埋剂的挑选和使用,接下来带领大家了解特殊包埋方法以及如何使石蜡包埋取得最佳效果。

 

我们正常的病理标本采用石蜡包埋都可以获得较为满意的切片,但有些标本需要特殊方法才能制作,用普通的包埋方法达不到要求,比如需要加急的标本、又比如体液标本,这样的标本就需要有特殊的包埋方法。

 

01  快速石蜡包埋法

主要应用于加急标本的快速诊断,且组织块太小或太碎,无法采用冰冻切片方法制片时,取材要薄。将薄小的组织块投入40%甲醛10ml、95%乙醇85ml、冰cu酸5ml的混合固定兼脱水液中2分钟,入纯丙酮Ⅰ3分钟,入纯丙酮Ⅱ3分钟,入苯2分钟,浸蜡5分钟,快速包埋组织后进行冷却切片、烤片、脱蜡至水、染色及封固。

 

02  体液石蜡包埋法

对于体液标本,如痰液、胃液、尿液、腹水和胸水等,作病理切片检查时,也可用石蜡进行包埋。

 

如果是痰液,应选取痰中含有血液的部分或可疑的实体部分,包在双层纱布内,先以10%中性甲醛固定,再经脱水、透明和浸蜡,最后包埋。浊的液体放入离心管中,以2000~3000次/分钟转速进行离心沉淀15秒。

 

凡是新鲜胃液、尿液、腹水和胸水等液体标本,应先倒去上面的澄清液体,将下面较为混浊的液体放入离心管中,以2000~3000次/分钟转速进行离心沉淀5~10分钟。再倒去上清液,并以10%甲醛固定下面的沉淀物,然后进行脱水、透明、浸蜡和包埋。

 

如何使石蜡包埋取得*佳效果

 

我们可以做一些提高石蜡包埋效果的工作,以人为的力量改善石蜡的韧性和黏度:这种方法是在石蜡中加入一些其他物质。

 

 

01   蜂蜡

蜂蜡,又叫黄蜡,是蜜蜂用来造巢的淡黄色蜡,蜂蜡的熔点在54℃左右,质地柔软,滑润有韧性。为了使低熔点的石蜡硬一些,可加入10%~20%的蜂蜡。它能增加蜡的熔点而不必使组织浸在高温内,便于切片。同时也要根据组织的种类而异,一般常规用量不超过5%为度。

 

一般我们如切制4~5μm的切片,56~58℃的石蜡基本达标,但如果要切制1~3μm的切片,其韧性和黏度就显不够,就会出现石蜡无法支撑的现象,因为光有硬度的石蜡会很脆,容易断裂,如果加入蜂蜡,使其韧性和黏度加强,就可以制出更好的切片。

 

02   硬脂酸

如果想加强石蜡的硬度,可以加入硬脂酸、松香等。硬脂酸为有光泽的白色片状结晶体,不溶于水,而溶于乙醇,醚和氯fang。熔点64~71℃,在蜡中加入少量的硬脂酸可增加石蜡的渗透性。

 

03   松香

为棕黄色半透明的固体,质硬而脆,遇热熔解,呈胶体状,同石蜡混合时,可增加石蜡的硬度,由于松香质脆,混合后可增加硬度但韧性不足。

 

当然使用质量好的石蜡,也是重要的,不能为了省钱,而购置杂质很多的石蜡,切出的片子也好不到哪去。因含杂质太多不光影响石蜡对组织的浸透,而且在切片时,还可因石蜡的杂质过多,含有大的颗粒,而使片子出现划痕。

 

Leica提供多种石蜡供选择,其中39601006(Paraplast  Regular石蜡,常用型,颗粒装,8*1公斤/箱,56℃,脱水/包埋通用)和39601095(Paraplast High Melt石蜡,高熔点型,颗粒装,8公斤装,56-58℃,脱水/包埋通用)广州东锐常备库存。

 

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