产品分类

您的位置:首页 > 技术文章 > 从兔单抗到重组兔单抗

技术文章

从兔单抗到重组兔单抗

时间:2019-02-15 浏览次数:1056

       自 1998 年起,Abcam 始终致力于为全球的科学家提供各种生物试剂和试剂盒。为了满足不断变化的科研需求,Abcam投入大量人力物力开发新技术。

      十多年前,医学家朱伟民一手打造出了 Abcam 的 RabMAb® 抗体平台。该平台出品的抗体现已广泛用于全球的研究、诊断和治疗领域。

      众所周知,RabMAb 一抗的制备有别于常规的利用小鼠或大鼠的生产方法,而是利用了独有的技术“兔单克隆抗体生产方法”。

     
      其基本原理与制备小鼠单克隆抗体相似。

       兔融合伴侣细胞能与兔 B 细胞融合,形成兔杂交瘤细胞——真正的兔-兔杂交瘤细胞 。随后筛选杂交瘤细胞以选择具有特异和敏感的抗原识别能力的克隆体,并采用多种方法鉴定抗体(参见下图的 RabMAb 生产工艺)。

      

      兔与其他物种,如小鼠、大鼠、鸡相比,拥有独特的免疫系统。它有很大的B细胞反应库(repertoire),这意味着它们可产生多样的抗体。

 

      兔免疫系统的亲和力优化机制也比小鼠和其他啮齿动物更有效。可利用兔产生这些高亲和力的抗体,甚至是针对在小鼠中不具有免疫原性的抗原也能产生抗体。平均而言,兔单克隆抗体对靶抗原的亲和力是小鼠单克隆抗体的 10-100 倍。由于具有更大且更多样的 B 细胞反应库,兔抗体在区分诸如表位变异(如修饰)、突变和构象变化等细微差别方面也更具优势。

 

      然而无论基于动物来源,还是基于杂交瘤的抗体制备过程,都可能会面临批次差异这样的问题:有的时候小鼠抗体初表现良好,但在后续批次中却无法产生相同的结果。

      这可能是由于杂交瘤细胞系漂移、基因丢失或突变。尽管多克隆抗体在生命科学研究中始终发挥着重要作用,但批间差异会更加频繁地出现。

 

      为了向用户提供具有优异灵敏度和极高一致性的抗体,abcam设计了 RabMAb 兔单抗的重组版本。这种组合可提供多种独特优势。

       重组抗体是通过将免疫特异性重链和轻链抗体克隆到高产的哺乳动物表达载体中而制成的。将得到的载体引入到表达宿主(如细菌、酵母或哺乳动物)中,用于生产高质量的功能性抗体。可在体外通过克隆 ScFV 或 Fab 形成 Ig 框架来构建重组抗体,也可从现有的杂交瘤细胞中产生重组抗体。在基于杂交瘤的重组抗体制备中,常用的是小鼠、大鼠和兔模型。然而,只要有适当的寡核苷酸引物可用,可从任何物种中开发重组抗体。

       重组抗体的优势

      与传统的单克隆抗体和多克隆抗体相比,重组抗体具有若干优点:

      1、更高的一致性和重复性

      因为重组抗体是由一组独特的基因发展而来的,所以抗体生产是可控且可靠的。可以避免杂交瘤细胞制备中的一些问题,如基因丢失、基因突变和细胞株漂移等。这使得抗体的批次间差异非常小,从而为您提供高度可重复的结果。 
 

      2、更高的灵敏度和特异性

      利用重组技术,更容易通过抗体工程提高抗体特异性和灵敏度。所需克隆的选择过程发生在杂交瘤细胞和重组克隆阶段,这使我们能够选择合适的抗体质量。

 

      3、易于扩展

      随着抗体基因的分离,与传统单克隆技术相比,抗体表达能够以任何规模在更短的时间内进行。这意味着我们可以在数周而非数月内产生定制抗体。

 

      4、无动物高通量生产

      一旦分离出产生抗体的基因,就可以实现无动物体外生产。

 

      当前,abcam拥有超过 10,000 种重组 RabMAb 抗体,其中很多都是经过KO敲除验证的,同时保证了检测结果的一致性和重复性。

      而且重组 RabMAb 抗体还在关键应用(WB、IHC、ICC/IF、IP 和流式细胞术)和物种(人、小鼠和大鼠)中进行了验证,可以满足绝大多数科研工作者的需求。

 

      在此建议所有抗体使用者在购买抗体时关注重组及特异性数据。

 

在线客服
返回顶部