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密理博超滤管如何使用?使用过程又需要注意哪些事项?

更新时间:2023-06-28 浏览次数:350

  密理博超滤管具有快速超滤功能,能够达到较高的浓缩倍数,轻松实现从稀释和复杂的混和样本中浓缩回收目的产物。垂直设计的超滤膜以及较大的有效滤膜表面积有助于快速的样本处理,获得较高样本回收率(通常>90%),并达到30倍的浓缩。

  根据标称分子量限值(NMWL)的不同,典型处理时间为10-30分钟。超滤膜的垂直设计也较大程度降低了溶质极化造成的滤膜结垢;死体积设计能有效防止过度离心使样本干掉而造成样本损失。收集滤出液后,浓缩样本(截留部分)可通过一个简便的倒置(上下反转)离心步骤而实现高效回收。超滤管未经消毒,仅供一次使用。 

  密理博超滤管的应用:
  1.浓缩或纯化生物样本。
  2.纯化组织培养提取液或细胞裂解液中的大分子成分,去除反应液中的引物、接头或分子标记,在HPLC前去除蛋白质。
  3.除盐,缓冲液更换,或渗滤。

 

  密理博超滤管使用:
  1.预处理:新超滤管:使用前用纯水浸泡,冰箱预冷10min。然后将水倒出,置于冰上预冷2-5min,加样;
  旧超滤管:倒出管内的乙醇浸泡液,用纯水冲洗干净10遍(注意水流速尽量平缓,防止冲破滤膜),置于冰上预冷2-5min,加样。
  2.加样:如超滤管中有少许残留水可将内管倒置1000×g离心1min,移液枪移取适量样本加入超滤管中。
  3.离心:配平,12000×g离心(15-30min),等达到目的转速后方可离开。
  4.样本收集:外管滤液为除去部分蛋白的样本上清,如需取浓缩后样本用于其他实验,则另取外管,内管倒置,1000×g离心1-2min。
  5.清洗:使用完的超滤管用纯水反复清洗5次,再用75%乙醇冲洗3次。

  注意事项:
  1.其最大离心力不能超过12000g,否则会导致滤膜破损;
  2.超滤样本会损失五分之一至二分之一的样本量,主要取决于样本中蛋白含量;
  3.若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入纯水,然后用枪头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲;
  4.内管不能用烘箱进行烘干。
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