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这样操作肿瘤解离试剂盒,即简单又快速
更新时间:2021-08-26 浏览次数:680
肿瘤解离试剂盒具有高效、快捷、易批量操作等优点,不同的厂家提供不同种类,不同类型的肿瘤解离试剂盒产品,为科研用户带来方便。
实验前的准备工作:
1、准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等;
2、确定试剂盒在有效期内;
3、仔细阅读说明书;
4、按说明书确定所有试剂齐全;
5、标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备,尽量分装做备份;
6、根据检测标本数量确定所需试剂的量;
7、按说明书将所用试剂盒平衡至室温,配制所需试剂。
肿瘤解离试剂盒的操作步骤:
1、使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差;
2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内;
3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时;
4、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次;
5、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟;
6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次;
7、每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照;
8、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果;
9、在450nm波长处测定各孔的OD值。
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