肿瘤解离试剂盒已被开发用于从人肿瘤组织中温和、快速地产生单细胞悬液。 该试剂盒用于产生大量肿瘤细胞和肿瘤浸润淋巴细胞，同时保留重要的细胞表面表位。该试剂盒与gentleMACS™ Dissociators结合，非常适合用于节省时间和可重复的制备单细胞悬液。

 

　　肿瘤解离试剂盒试剂准备：

　　1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温（18-25℃），试剂不能直接在37℃溶解。

　　2、标准品（冻干品）：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液（0pg/mL）直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

　　3、浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。

 

　　肿瘤解离试剂盒的样品收集、处理及保存方法：

　　1、血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离；

　　2、血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒；

　　3、细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物；

　　4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液；

　　5、保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。